Помогите понять анализ на ВЭБ

Анализ крови на ВЭБ инфекцию у ребенка: что это такое, расшифровка

К группе вирусов герпеса, наряду со всеми известными простым герпесом (простуда на губах), ветрянкой, розеолой или генитальным вариантом вируса, относятся также и некоторые другие. Всего известно 8 типов герпеса, опасных для детей, и 4-й тип – это вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), провокатор мононуклеоза, а при стечении особых обстоятельств – и многих более опасных патологий.

Опасность вируса ВЭБ Кому показаны анализы? Анализ крови на ВЭБ: что показывает у ребенка Анализ на ВЭБ-инфекцию: норма и расшифровка у детей Общая оценка результатов анализов Подготовка к анализу на ВЭБ-инфекцию

Проблемой именно этого вируса является тот факт, что его попадание в организм не всегда означает инфекцию, но он может крайне негативно влиять на иммунитет ребенка, формируя субклинические иммунодефициты.

Кроме того, перенесенный ранее мононуклеоз на 6-12 месяцев после него создает более благоприятные условия для различных респираторных инфекций, что может формировать частые и осложненные ОРВИ.

Поэтому важно своевременное и активное выявление ВЭБ-инфекции в любом возрасте.  

Важно

Чем младше ребенок, тем тяжелее может протекать в его организме ВЭБ-инфекция, особенно она опасна для плода и новорожденного.

Кому показаны анализы?

Проведение анализов на ВЭБ может быть показано детям и подросткам при подозрении на мононуклеоз или при его исключении, а также беременным женщинам, чтобы исключить внутриутробное поражение плода вирусом. Опасен вирус детям с врожденными и приобретенными иммунодефицитами, младенцам, особенно недоношенным или имеющим аномалии развития.

Также анализы назначают при наличии увеличения лимфоузлов с их воспалением и болезненностью, при наличии атипичной ангины и длительной лихорадки более 38.5 ℃ с симптомами, похожими на грипп или ОРВИ.

Важно

Если в анализе крови возникают изменения, которые типичны для мононуклеоза, для подтверждения диагноза или его опровержения проводят более специфичные анализы.

Анализ крови на ВЭБ: что показываету ребенка

Если говорить об общем анализе крови – это первый из анализов, который может помочь в определении ВЭБ. В нем может наблюдаться увеличение абсолютного количества лимфоцитов, сдвиг лейкоцитарной формулы и понижение количества гемоглобина и эритроцитов. Кроме того, типично повышение уровня тромбоцитов, что грозит повышением свертываемости крови – тромбофилией.

Обратите внимание

Но самый главный признак ВЭБ – это появление атипичных мононуклеаров (совиный глаз), атипичной формы пораженных лимфоцитов, которые становятся похожими на моноциты.

Дополняет картину изменение в биохимическом анализе крови – выявление аномалий в печеночных ферментах и работе селезенки.

Важно

Подобные отклонения типичны как для инфекционного мононуклеоза, так и для некоторых других тяжелых вирусных инфекций, поэтому для подтверждения диагноза необходимо будет ПЦР исследование крови с выявлением ДНК вируса ВЭБ.

Подобные анализы показаны беременным для исключения врожденного мононуклеоза и поражения плода ВЭБ, для новорожденных с признаками иммунодефцита и врожденных патологий, а также для детей с характерными проявлениями ангины, лихорадки и лимфаденоптии.

Самыми основными исследованиями для выявления ВЭБ-инфекции являются определение антител к вирусу методом иммуноферментного анализа или выявление ДНК вируса методом ПЦР.

Анализ на ВЭБ-инфекцию: норма и расшифровка у детей

У детей проводят целый ряд анализов, выполняемых в образце крови. Это важно для определения не только факта заражения, но и стадии болезни. От этого зависит тактика лечения.

ИФА с определением антител к ВЭБ проводится в образце венозной крови ребенка, определяются иммуноглобулины 5 основных видов IgG или IgM к раннему, капсидному либо ядерному антигенам.

Для исследования нужна плазма крови, в ней циркулируют антитела. В зависимости от лаборатории, проводится исследование метолом прямой ИФА, непрямой или сендвич-ИФА.

Этот метод позволяет не только определить наличие антител к ВЭБ, но и помогает в уточнении стадии болезни.

Важно

Разные виды антител (IgG или IgM) синтезируются в разной стадии инфекции, и таким образом те или иные позитивные реакции типичны для разных стадий ВЭБ-инфекции.

Нормативными значениями для ИФА-исследования являются отрицательные результаты всех тестов – они указывают на отсутствие ВЭБ в организме. Но отрицательные результаты могут показать начальную стадию болезни, когда антитела еще не наработались.

Появление антител класса IgМ к раннему антигену можно выявить через 1-2 недели с момента попадания ВЭБ в тело, это острая стадия инфекции. Также они повышаются в период реактивации вируса. Перестают определяться эти иммуноглобулины примерно к концу полугодия с момента заражения. На фоне хронической ВЭБ-инфекции их очень много, при атипичном течении – они не выявляются.

Иммуноглобулины IgG к капсидному антигену также определяются рано, примерно к 3-4 неделе с начала болезни, но максимума их концентрация достигает к двум месяцам болезни.

Важно

В острой фазе инфекции в детском возрасте могут не определяться.

При наличии хронической ВЭБ-инфекции, особенно на фоне реактивации вируса, количество этих антител максимально. Они остаются в крови зараженных людей пожизненно, как и сами вирусы, указывая на формирование к инфекции стойкого иммунитета.

Антитела класса IgG к ядерному антигену указывают на прямой контакт с вирусом. Они не определяются в острой фазе болезни, определяясь после выздоровления с периода от 3 до 10 месяцев. В крови они циркулируют до нескольких лет.

Важно

Наличие тех или иных вариантов антител говорит о свежести инфекции: только острофазные IgM говорят о первичной и недавней инфекции. Одних только антител в крови для определения острой инфекции или врожденного ВЭБ нередко слишком мало. Тогда для подтверждения диагноза необходимо определить ДНК самого ВЭБ в плазме.

ПЦР-исследование плазмы на определение ВЭБ помогает при первичной инфекции, определяя наличие вируса в плазме. Для реактивации инфекции методика определения не подходит. Нормативные значения – это отрицательная реакция, указывающая на то, что вируса в крови нет. Наличие позитивной реакции в острой стадии болезни говорит о ВЭБ-инфекции.

Общая оценка результатов анализов 

Если у ребенка имеется бессимптомное носительство ВЭБ или он находится в периоде инкубации острой инфекции, ПЦР отрицательный. Такой же результат будет при отсутствии вируса в организме. В начальных стадиях острой инфекции возможны как отрицательные, так и слабо-положительные результаты.

В стадии разгара, если это острая ВЭБ-инфекция, либо на фоне хронизации процесса, при реактивации вируса, при наличии атипичного течения ВЭБ – ПЦР-реакция дает положительный ответ. Если ребенок переболел несколько лет назад, вирус неактивен и есть к нему иммунитет – ПЦР даст отрицательную реакцию.

Важно

Спутать результаты могут вирусы герпеса 5 и 6-го типов, имеющиеся в крови, либо вирус ВИЧ или токсоплазма. Поэтому предварительно проводят анализы, которые исключают у ребенка все эти болезни.

Подготовка к анализу на ВЭБ-инфекцию

У детей провести анализ на ВЭБ можно в слюне, моче или крови, зачастую проводят именно исследование крови и мочи, так как их легче всего собрать. При этом кровь дает наиболее точную информацию.

Для того чтобы результаты были максимально точными и не пришлось повторно брать кровь у малыша, важно правильно подготовиться к исследованию. Все анализы крови берутся утром, до полудня и строго натощак.

Обратите внимание

Перед исследованием вечером не стоит давать ребенку жирную пищу, утром можно давать только воду. Кровь стоит забирать после 10-15 минутного отдыха, в спокойном состоянии.

За сутки до исследования стоит оградить ребенка от стрессов и тяжелых физических нагрузок, занятий спортом.

Важно максимально отменить все принимаемые препараты за два дня до забора крови, если отменять препараты нельзя – важно сообщить названия принимаемых ребенком лекарств врачу-лаборанту.

За полчаса до забора крови нужно давать ребенку больше пить кипяченой воды. После забора крови можно вести привычную жизнь.

Парецкая Алена, врач-педиатр, медицинский обозреватель

4,290  6 

(57 голос., 4,84 из 5)
Загрузка…

Анализ на вирус Эпштейна-Барр: методы диагностики и расшифровка

Вирус Эпштейна-Барр очень распространен в человеческой среде, им инфицировано больше половины населения. Проявления инфекции разнообразны.

Она может протекать бессимптомно или вызывать серьезные патологии, которые приводят к летальному исходу.

Поэтому анализ на вирус Эпштейна Барр имеет широкое применение в клинической практике и позволяет определить стадию течения заболевания и его активность.

Показания для диагностики

Чтобы назначить исследование крови, нужно определиться с показаниями для анализа и выбрать наиболее подходящий вид диагностики. Анализ крови назначают в таких случаях:

• подтверждение инфекционного мононуклеоза;
• увеличение затылочных, шейных, подчелюстных лимфоузлов;
• симптомы, напоминающие мононуклеоз у лиц с иммуносупрессией, после химиотерапии, пересадки органов;
• частые рецидивы воспалительных заболеваний ротоглотки;
• профилактическое исследование;
• гепатит неустановленной этиологии, а также увеличение печени и селезенки;
• болезни желудочно-кишечного тракта, плохо поддающиеся стандартному лечению;
• перенесенный мононуклеоз у женщин, планирующих беременность;
• отягощенный акушерский анамнез, дети с врожденными пороками, мертворождения или самопроизвольные выкидыши;
• дети с признаками внутриутробной инфекции или рожденные женщинами с высоким риском передачи болезни;
• новорожденные с сепсисом, гепатитом, менингоэнцефалитом, пневмонией.

Для взрослых людей используют серологические тесты, направленные на определение различных классов антител. Также показательна полимеразная цепная реакция. Для новорожденных необходимо применять ПЦР, чтобы определить наличие ДНК вируса. В серологических тестах выявить IgM невозможно, иногда появляются IgA к некоторым ранним типам антител.

Подготовка к анализу

Правильная подготовка к анализу позволяет избежать сгущения крови и неверной интерпретации результатов. Основным исследуемым материалом является кровь, но для ПЦР может использоваться спинномозговая жидкость, слизь из носоглотки, соскоб клеток носоглотки, половых органов.

За сутки до анализа исключают алкоголь, жирную еду. Последний прием пищи должен быть не позднее 20:00. Кровь сдают натощак, при этом перед ее забором нельзя курить и следует отдохнуть около 15 минут. Если пациент принимает какие-либо лекарства, нужно прекратить это делать на время анализа, в остальных случаях достаточно предупредить лаборанта.

Ребенка до 5 лет нужно поить кипяченой водой на протяжении 30 минут до сдачи крови. Объем выпитого может достигать 200 мл.

Серологическая диагностика

Для исследования необходимо сдавать венозную кровь. С помощью иммуноферментного анализа определяют различные классы иммуноглобулинов. Это специфические белки, которые вырабатываются клетками крови для нейтрализации и запоминания возбудителя. Они выводятся отдельно для различных пептидных структур вируса: капсида, ядра.

Расшифровать результаты анализа можно по порядку появления антител. Первыми в крови определяются IgM, они синтезируются к капсидному антигену (VCA) и появляются в период острой болезни. Исчезают иммуноглобулины через 4—6 недель от начала заболевания. При реактивации латентной инфекции эти антитела также появятся.

IgG к раннему антигену ЕА появляются с началом острой фазы болезни при первичном инфицировании, а также при реактивации. Их можно выявить через 1—2 недели после заражения, сохраняются они до 4 месяцев после выздоровления.

О перенесенной ранее инфекции говорит выявление ядерного антигена IgG EBNA. В крови они появляются только через 4—6 месяцев после начала заболевания. Даже при латентном течении болезни этот класс иммуноглобулинов выделяется в крови. Они не исчезают на протяжении всей жизни.

Расшифровка серологического анализа на вирус Эпштейна-Барр включает количественное определение антител.

Каждая лаборатория использует свои тест-системы, в которых применяются различные нормы показателей. Поэтому расшифровывать конкретный анализ может только лечащий врач. Диагностику проводят в динамике, анализы назначают через 2 недели, затем еще через 4 и 6 недель, 3 и 6 месяцев. По нарастанию и убыванию типов и титров антител можно определить течение заболевания.

ПЦР

Метод лабораторного поиска направлен на выявление ДНК возбудителя. Предметом исследования становятся любые биологические жидкости, в том числе и моча, секрет простаты, слюна.

И у больных, и у носителей вируса исследование выявит его нуклеиновую кислоту. Поэтому для точности диагностики применяют анализ с заданной чувствительностью. Для носителей это до 10 копий в пробе, у больных должно быть 100 копий.

Ребенок до 3 лет имеет несформированный иммунитет, поэтому метод ПЦР является основным в диагностике вирусной инфекции.

Расшифровка заключения лаборатории не представляет сложности: положительный результат говорит о наличии вируса в организме, отрицательный — возбудителя нет.

Другие лабораторные исследования

Обнаружить измененные клетки, которые поражены ВЭБ, можно с помощью общего анализа крови. В мазке определяются атипичные мононуклеары, а также повышение общего уровня лейкоцитов и СОЭ, при норме 3,9—10,0*109 ед/л и 2—16 мм/ч соответственно. В некоторых случаях врачи ограничиваются анализом крови, чтобы поставить диагноз «инфекционный мононуклеоз».

Вирус поражает печень и селезенку, поэтому проводят печеночные пробы. Отклонения касаются повышения уровня трансаминаз, тимоловой пробы, общего билирубина и щелочной фосфотазы. Значительное увеличение показателей говорит о развитии осложнения мононуклеоза — токсического гепатита.

В некоторых случаях по показаниям назначают иммунограмму. Этот анализ определяет иммунный статус пациента, который может оказаться повышенным или пониженным. Результаты диагностики помогают выбрать подходящее лечение.

Антитела к вирусу Эпштейна-Барра: показания, анализ, расшифровка

Анализы крови к антителам назначаются достаточно часто. Они позволяют выявить вирусные и бактериальные поражения организма, даже если они протекают бессимптомно. Исследование крови на антитела к вирусу Эпштейна-Барра проводится по показаниям и не входит в комплекс мер, предусмотренных плановой диспансеризацией.

Что такое антитела к вирусу Эпштейна-Барра (ВЭБ)?

Возбудитель относится к группе герпесвирусов

Вирус Эпштейна-Барра относится к группе герпесвирусов. Он поражает лимфатическую систему, слизистые оболочки, ЦНС и практически все внутренние органы. Симптомов при поражении не возникает, и человек не подозревает об инфицировании.

Согласно международной статистике, вирусом поражены или перенесли его ранее каждые 9 человек из 10.

Антитела против вируса вырабатываются иммунной системой человека. Они представляют собой иммуноглобулин (особый вид белка), который продуцируется клетками лимфоцитами. Их предназначение — связывание антигенов вируса. Для каждого антигена организм продуцирует свои антитела, из-за чего при анализе по наличию тех или иных белков удаётся установить заражение различными инфекциями.

Чем опасна ВЭБ-инфекция?

Инфекция может стать пусковым фактором рассеянного склероза

Опасность вируса заключается в том, что он приводит к снижению иммунитета и может быть основной причиной для начала развития аутоиммунных патологий и диабета. Инфекция способна вызвать врождённые уродства у ребёнка. Также, по мнению врачей, ВЭБ-инфекция, возможно является причиной, по которой развиваются следующие опасные патологии:

• рассеянный склероз,
• онкологические поражения,
• тяжёлые острые аллергии.

Кроме того, из-за влияния на работу иммунной системы вирус вызывает ослабление естественной защиты организма. Это приводит к значительному усложнению любых заболеваний и повышает риск развития осложнений большинства патологий и даже незначительных травм.

Показания к исследованию

Частые ОРИ — показание анализу

Проводится исследование крови на наличие антител к ВЭБ только по показаниям. Основными из них являются:

• наличие симптомов, позволяющих заподозрить мононуклеоз инфекционной природы, который всегда сопровождает поражение ВЭБ;
• частые вирусные инфекции, такие как грипп и ОРЗ;
• ангина, которая развивается 3 раза в год или чаще;
• простуда, при которой всегда отмечаются заметное увеличение в размерах лимфатических узлов и повышение температуры до высоких значений;
• разовое увеличение лимфатических узлов, гланд и аденоидов;
• период планирования беременности;
• наличие онкологических заболеваний;
• обнаружение ВИЧ инфекции.

Также в ряде случаев исследование крови на антитела к вирусу назначается при наличии синдрома хронической усталости.

Как подготовиться к исследованию

Накануне теста стоит минимизировать физическую активность

Для получения максимальной точности данных при анализе требуется подготовка к исследованию, которая заключается в следующем:

• отказ от каких-либо лекарственных препаратов за сутки до сдачи крови;
• отказ от алкоголя и табачных изделий за сутки до анализа;
• минимизация физических и эмоциональных нагрузок за 12 часов до сдачи материала;
• отказ от еды за 12 часов до анализа.

При необходимости специфической подготовки по индивидуальным показаниям рекомендации даёт врач, назначающий исследование крови на антитела.

Способы выявления антител к ВЭБ

Выявить антитела можно с помощью нескольких методик

Для выявления антител к вирусу могут быть использованы различные методы.

Гетерофильные антитела

При таком методе специфические гетерофильные антитела к ВЭБ определяются при помощи агглютинации с эритроцитами из крови барана, быка или лошади, которые прошли особую обработку.

Обнаружение данного вида антител возможно в течение полугода с момента инфицирования человека. Исследование проводится у взрослых и даёт точность результатов до 99%.

Для детей точность такого исследования только 30%.

Серологические исследования

Серологический тест информативен спустя 14 дней

При этом методе из сыворотки крови выделяются специализированные антитела против вируса. После инфицирования мононуклеозом наличие антител против ВЭБ выявляется через 2 недели с момента инфицирования. В ходе исследования проводят иммуноферментный анализ, а также применяют методы антикомплемант-флюоресценции и непрямой флуоресценции.

Антитела к раннему антигену

Ранний антиген и антитела к нему появляются первыми после момента заражения. Антигены обнаруживаются только в В-лимфоцитах и находятся в их цитоплазме. Обнаружение таких белков возможно ещё в инкубационном периоде. Выявление данных антител возможно в течение 6 месяцев с момента заражения.

Антитела к капсидному антигену

Антитела к капсидному антигену сохраняются пожизненно

Обнаружение антител к данному антигену является ценным диагностическим результатом. Они присутствуют в течение жизни, что позволяет выявлять переболевших вирусом даже через большой промежуток времени от момента инфицирования. После заражения определяются антитела только с 2 месяцев. Наличие данных антител указывает на устойчивость организма к ВЭБ.

Антитела к нуклеарному антигену

Выявить антитела к данному антигену возможно только на позднем этапе. Они указывают на то, что начался процесс активного выздоровления, но вирус ещё присутствует в организме. После болезни в течение длительного времени результат исследования на антитела к нуклеарному антигену может сохраняться положительным.

Расшифровка результатов

Результаты анализов интерпретирует врач

Расшифровку полученных в результате анализа данных проводит лечащий врач. Работники лаборатории не имеют права консультировать человека относительно результатов, и всё сказанное ими может расцениваться только как озвучивание показателей, но не врачебное заключение.

Ложноположительный результат

Нет метода, который был бы точным на 100%. Из-за этого возможно наличие ложноположительного результата. Основной причиной этого явления бывают нарушения в подготовке к исследованию и проведение анализа сразу после перенесённой болезни. Также исказить данные могут иные герпесвирусы.

При подозрении на неправильность результатов анализ проводят повторно через 2-3 недели.

Как сдавать ПЦР на вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) и для чего его делают

Анализ на вирус Эпштейна-Барр производится двумя способами: ИФА, который выявляет антитела к антигенам и устанавливает форму развития инфекции (хроническую, острую, бессимптомную), и ПЦР (полимерная цепная реакция).

Метод ПЦР на вирус Эпштейна-Барр исследует ДНК клеток вируса, определяет его наличие или отсутствие у человека.

ПЦР рекомендуется для обследования детей, так как организм ребёнка ещё не успевает выработать антитела, а также, когда результат ИФА вызывает сомнение.

Особенности проведения ПЦР

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) относится к самым распространённым заболеваниям, его носителями являются почти 65% детей до трёх лет, а также 97% взрослых. Это одна из разновидностей герпесвирусов (4-го типа), которая после заражения вызывает заболевания:

1. Лимфоретикулярной системы: изменение лимфатических узлов, поражение печени и селезёнки.
2. Иммунной системы: поселяется внутри В-лимфоцитов, нарушает их функциональные свойства, что вызывает иммунодефицит, вызывает разрушение клеточного звена иммунитета.
3. Эпителиальных клеток дыхательных и пищеварительных органов: проявляется респираторным синдромом, а именно кашлем, одышкой, «ложным крупом», возможно поражение внутренних органов.

Считается, что ВЭБ иногда является провоцирующим фактором развития злокачественных новообразований: лимфомы Бёркитта, рака носоглотки, лимфогранулематоза, хотя окончательных доказательств этого нет. Кроме того, наблюдается аллергия почти у каждого четвёртого носителя хронической ВЭБ-инфекции.

Вирус сохраняется в организме всю жизнь, он вызывает хроническую инфекцию, которая обостряется при возникновении благоприятных для неё условий.

Что такое ПЦР

Известны две разновидности ВЭБ, но серологически они ничем не отличаются. Заражение возможно от носителя в конце инкубационного периода, весь срок протекания болезни, в течение полугода со дня выздоровления. У отдельных больных имеется способность время от времени выделять вирус, то есть становиться его носителями даже спустя многие месяцы после инфицирования.

ПЦР-диагностика предполагает выявление ДНК вируса путём использования методов молекулярной биологии. Для исследования используются особые ферменты, которые многократно копируют фрагменты ДНК и РНК клеток. Затем полученные фрагменты сверяются с базой данных, выявляется присутствие ВЭБ и его концентрация.

Материалом при определении ДНК вируса Эпштейна-Барр становятся слюна, слизь из ротовой или носовой полости, кровь, пробы спинномозговой жидкости, соскобы клеток урогенитального канала, моча.

Целесообразность выбора того или иного материала определяется врачом. Обычно для ПЦР предпочтительна кровь, которую забирают в колбу с раствором ЭДТА (6%).

У маленького ребёнка иммунитет находится в стадии установления, поэтому метод определения антител к ним не применяется, для детей используется ПЦР.

Результат ПЦР часто бывает положительным, поэтому требуется дифференцировать больного человека и вирусоносителя, для этого применяется анализ с различной чувствительностью:

• до 10 копий на одну пробу – для носителей;
• до 100 копий – при активном вирусе Эпштейна-Барр.

ПЦР даёт очень высокую степень правильности результата, но особенность этого анализа состоит в том, что он информативен только в период репликации, потому присутствует 30% ложноотрицательных результатов по причине отсутствия репликации на момент анализа.

В период беременности считается обязательным несколько раз сдать анализ ПЦР, если вирус впервые выявлен уже после наступления беременности, для своевременного обнаружения реактивации вируса.

Подготовка к сдаче анализа

При сдаче анализа на вирус Эпштейна-Барр требуется исключить все факторы, которые могут исказить результат ПЦР:

1. Биологический материал необходимо брать утром натощак.
2. Накануне проведения ПЦР рекомендуется отказаться от плотного ужина. Лучше немного перекусить за 9 часов до времени взятия биоматериала.
3. За трое суток до сдачи анализа исключить алкоголь, энергетические напитки, жирную, сладкую или мучную пищу.
4. За день до анализа исключить чай и кофе, газированные напитки.

Перед анализом маленьким детям дают кипячённую воду (до 200 мл в течение получаса). Не рекомендуется принимать лекарства, начиная за 10-14 дней до ПЦР, но если они необходимы по жизненным показаниям, то их названия нужно предоставить врачу, который будет расшифровывать анализ.

Диагностика вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ): анализ крови, ДНК, ПЦР, печеночные пробы

Когда ПЦР будет готов

Известно несколько методик ПЦР-диагностики. Но самым достоверным и широко используемым стал анализ в реальном времени, при котором почти никогда не бывает ложноотрицательных показателей и доступен быстрый результат.

Результат ПЦР можно будет получить через несколько часов или несколько дней, все зависит от лаборатории и экстренности ситуации. Средняя продолжительность ожидания результата 1-2 дня.

Расшифровка ПЦР при вирусе Эпштейна-Барр

Самыми первыми причинами для назначения ПЦР являются превышение лейкоцитов, тромбоцитов и понижение нормы эритроцитов и гемоглобина крови. При выявлении таких показателей пациенту назначается дополнительная диагностика — ПЦР.

Результат исследования бывает положительным или отрицательным. Положительный результат ПЦР свидетельствует, что сдавший анализ человек — носитель ВЭБ, хотя его наличие не доказывает того, что присутствует инфекция в острой или хронической форме.

Это доказывает то, что ВЭБ когда-то проник внутрь организма, так как герпес характеризуется тем, что после первичного попадания в организм его уже ничем нельзя вывести из него.

Серология, ИФА, ПЦР при вирусе Эпштейна-Барр. Положительный и отрицательный результат

Если требуется не только выявить присутствие вируса, но и определить стадию и форму заболевания, то назначается ИФА, анализ на антитела к антигенам ВЭБ, в ходе которого исследуются:

• антитела IgM VCA к капсидным антигенам вируса Эпштейна-Барр;
• IgG VCA — к ранним антигенам.

Присутствие и тех и других показывает, что заболевание находится в острой форме, потому что они исчезают в течение 4–6 недель после начала болезни.

ПЦР-диагностика считается молодым методом, но при этом достаточно достоверным. Выявить присутствие вируса возможно даже при наличии только одной молекулы днк-вируса.

Ввиду высокой точности данный вид обследования считается эффективным способом выявить герпесвирус и проследить за ходом лечения.

При этом ПЦР требует высокотехнологического оборудования с многоуровневой системой контроля и подготовленных специалистов.

Ранний, капсидный и ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр

Диагностика патологий, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр, подразумевает выявление уровня антител к ядерному антигену, капсидному и раннему.

Ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр представляет один из белков вирусной частицы, наличие иммуноглобулинов к которому говорит о хронизации процесса, а присутствие их после реконвалесценции объясняется циркуляцией клеток памяти. Антитела к вирусу Эпштейна-Барр способствуют различию стадии и формы инфекции.

Общая характеристика патогенеза и антигенов ВЭБ

Вирус Эпштейна-Барр относится к 4 типу патогенов из семейства герпесвирусов, проявляет сродство к лимфоцитам, обладает онкогенными и иммунодепрессивными свойствами.

Структура Epstein-Barr virus сложная, поэтому при диагностике применяют несколько анализов для верификации ВЭБ в организме. Кроме того, исходя из выявленных показателей, удается определить давность инфицирования и форму инфекции.

Структура вириона представлена следующими, диагностически важными, белками:

• VСА – наружный или капсидный антиген;
• ЕВNА – внутренний или ядерный антиген;
• МА – антиген мембраны;
• ЕА – ранние (диффузный ЕАD и локализованный ЕАR).

В-клетки одними из первых принимают удар, а далее, вирус распространяется по остальной лимфатической системе.

Первое заражение вирусом сопровождается поражением 30% В-лимфоцитов. ДНК вируса Эпштейна-Барр поступает в клеточное ядро, при этом лимфоциты становятся «бессмертными»: несмотря на инфицирование, они непрерывно размножаются, что определяется присутствием атипичных мононуклеаров.

В период бессимптомного течения ВЭБ-инфекции вирион, персистирующий в лимфоцитах, экспрессирует ядерные и мембранные белки, что означает возникновение антител к указанным антигенам.

Ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр провоцирует недоступность зараженных В-клеток для уничтожения иммунокомпетентными клетками.

В результате пораженные лимфоциты продолжают размножаться. Пролиферация их становится вирусзависимой.

В ответ на поражение В-лимфоцитов начинает активизироваться клеточное звено иммунитета, а именно Т-лимфоциты. Они тормозят избыточное размножение пораженных клеток, поэтому в анализах крови определяется лимфоцитоз, не только атипичные мононуклеары.

Цитотоксические иммунные клетки и киллеры (NK) сдерживают пул зараженных В-лимфоцитов, ограничивая патологический процесс, однако, погрешности иммунитета приводят к недостаточной атаке и постепенной пролиферации инфицированных человеческих клеток.

Во рту инфицированные клетки длительно локализуются в миндалинах, обуславливая выделение вирусных частиц с выдыхаемым воздухом, кашлем. ВЭБ покидает разрушенные В-лимфоциты для поражения новых.

Но описывают и иной тип паразитирования вируса Эпштейна-Барр в клеточных элементах – скрытый, когда образуется малое количество копий вируса, поддерживая тем самым носительство.

Вирус инфицирует не только В-клетки, но и ряд других клеток, несущих иммунную функцию, эпителиоциты сосудов. ДНК вируса в ядре может существовать в двух формах: кольцевая структура (эписома) или встроенная в геном.

Последняя приводит к хромосомным нарушениям, что лежит в основе онкологических заболеваний, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр.

Важно!

В процессе размножения вируса образуется более 70 белков, но современные достижения медицины позволяют обнаружить антитела в крови у человека только к 4 антигенам ВЭБ.

Показатели крови к вирусу герпеса 4 типа расшифровываются следующим образом:

1. Ранний антиген вириона обеспечивает выработку антител в начале заражения или при обострении.
2. Капсидный антиген вируса Эпштейна-Барр характеризуется продукцией иммуноглобулинов в острой фазе начала патологии, при реактивации процесса. Особенностью считается наличие иммуноглобулинов к капсидному белку VCA как при обострении хронической инфекции, так и при ремиссии.
3. Антитела к ядерному белку вируса определяются при любой разновидности формы хронической патологии. После выздоровления от острой формы их наличие означает циркуляцию антител памяти: инфекция протекала ранее.
4. Антитела к мембранному антигену циркулируют при скрытом течении ВЭБ-инфекции.

Образуют структуру вириона капсидный, ядерный и мембранный антигены – они считаются уникальными или вирусоспецифическими.

Антитела IgG и IgM — что это?

Иммунная система человека в ответ на внедрение чужеродных агентов инфекционного происхождения реагирует продукцией специальных антител – иммуноглобулинов, которые инактивируют патогены.

Антитела классифицируются на несколько разновидностей, из которых для большинства инфекций актуально определение двух: M и G.

В чем разница антител IgM и IgG? Белки разновидности (класса) М продуцируются первыми в ответ на проникновение возбудителя или повторную реактивацию процесса. Антитела IgM к вирусу Эпштейна-Барр самоустраняются примерно спустя три месяца от начала болезни.

IgG продуцируются через несколько недель и определяются в крови всю жизнь, означая, что инфекция перенесена пациентом ранее.

Вопрос возникает у многих людей, так как в рамках профилактического или диагностического обследования у взрослого человека будет такой результат с вероятностью ближе к 90%. Практически все взрослые люди инфицированы ВЭБ. Анализ означает, что инфекция перенесена.

При исследовании крови иммунохемилюминисцентным методом или ИФА выдают количественный результат, значения которого подразумевают отрицательный, сомнительный, положительный ответы.

Если получен сомнительный ответ, анализ крови повторяют через 7 дней. В случае второго сомнительного ответа анализ считают отрицательным.

Авидность позволяет установить срок давности заражения вирусным агентом. Авидность IgG к вирусу Эпштейна-Барр описывается большими значениями при давнем инфицировании, а низкое – говорит о свежем заболевании.

Расшифровка анализа на вирус Эпштейна-Барр помогает выяснить сроки попадания патогена в организм, форму инфекции.

Ранний антиген

Вскоре после поражения В-клеток в крови начинает формироваться пул иммуноглобулинов к раннему антигену. Когда уровень иммуноглобулинов достигает порогового уровня, их можно зафиксировать лабораторным методом.

Ранний антиген вируса Эпштейна-Барр не является структурным, он необходим для размножения вириона, к нему продуцируются антитела класса IgM и IgG.

Антитела IgM к раннему белку ВЭБ довольно рано формируются и так же быстро исчезают, поэтому выявить их зачастую не удается.

Антитела IgG к раннему антигену начинают свою выработку уже при начавшейся симптоматике – в фазу разгара.

Таким образом, идентификация иммуноглобулинов к белку раннего типа является тестом ранней диагностики. При этом длительное сохранение антител IgG к ЕА говорит о хронизации, а рост считается маркером обострения.

Капсидный антиген

Антитела к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр IgM начинают формироваться по окончании инкубации (в начале патологии) и к моменту разгара клиники имеют значения, определяемые лабораторно.

Важно!

Антитела класса IgM на капсидный антиген положительные и определяются на максимуме в течение 1,5 месяцев от начала заболевания, через полгода они снижаются.

Если иммуноглобулины М на капсидную форму белка вируса Эпштейна-Барр положительные на протяжении больше 12 недель, подозревают затяжной мононуклеоз и иммунодефицит.

Таким образом, положительный результат анализа крови на IgM к капсидному антигену подтверждает острую инфекцию. IgG положительный на первом месяце болезни, а пик достигается на 8 неделе от момента развития клиники.

При отсутствии признаков положительный IgG на капсидный антиген к вирусу Эпштейна-Барр подтверждают, что инфекция перенесена. Эти иммуноглобулины называют клетками памяти.

Если анализ выполняют в течение всей инфекции и определяют постепенное нарастание значения антител IgG, то выставляют острую инфекцию первичного характера.

Если в крови пациента длительно присутствуют IgG к VCA и к ЕА, возрастает вероятность хронизации. Очень высокие уровни IgG к VCA могут указывать на  лимфому Беркитта и рак назофарингеальной области.

Ядерный антиген

Антитела к ядерному антигену EBNA начинают продуцироваться после патологии в период реконвалесценции. Определению в большинстве подлежат иммуноглобулины IgG.

Антитела к EBNA могут фиксироваться несколько лет после острого мононуклеоза. Возрастает их количество на третьем-двенадцатом месяце от момента начала болезни.

Следует знать, что отсутствие этих иммуноглобулинов при параллельной циркуляции антител IgM к VCA, а также антител IgG к ЕА, указывает на текущий инфекционный мононуклеоз.

При наличии клиники мононуклеоза или другой ВЭБ-патологии изредка отсутствие данных иммуноглобулинов к Эпштейна-Барр указывает на выраженный иммунодефицит.

Обнаружение в крови антител к EBNA классов IgM при негативных IgG показывает на острое инфицирование. Если соотношение обратное, то процесс считается перенесенным ранее.

Обнаружение ДНК

С целью непосредственного обнаружения вирусной ДНК в биоматериале больного применяют ПЦР. Благодаря этому способу удается выявить вирус в следующих образцах и:

• в слюне;
• в цервикальном канале;
• в секрете предстательной железы;
• в моче;
• в соскобе из уретры.

С помощью ПЦР удается обнаружить не менее 80 вирионов в 5 мкл биологической жидкости. Специфичность теста приближается к 100%.

Результат возможно расценить двояко. Положительный ПЦР в слюне на вирус Эпштейна-Барр свидетельствует о носительстве или заболевании. Если присутствует характерная клиника и результат ПЦР положительный, диагноз подтверждается.

ДНК Эпштейна-Барр удается зафиксировать в начале заболевания. Спонтанное выделение возбудителя при исключении наличия клиники указывает на носительство.

В слюне ДНК определяют в конце инкубации, в фазе разгара и в течение полугода после выздоровления.

ВЭБ могут определять качественно и количественно при лечении хронической формы, при иммунодефиците на фоне Эпштейна-Барр, при терапии опухолей, связанных с вирусом.

Определение DNA EBV (Эпштейн-Барр вируса) в количественном выражении необходимо для анализа эффективности лечения, так как количественная ПЦР позволяет выявить вирусную нагрузку.

Если со временем при терапии число копий снижается, тактика выбрана верно. В норме копий вируса в биоматериале быть не должно.

Диагностика ВЭБ-инфекции имеет большое значение при планировании беременности, у часто болеющих детей и взрослых, пожилых людей.

С целью выбора адекватной тактики лечения, идентифицируют антитела к белкам Эпштейна-Барр, а также определяют ДНК с помощью ПЦР. Анализы помогают выявить давность заражения и форму инфекции.

Куликовская Н.А., врач-инфекционист

Вирус Эпштейна Барр диагностика: тесты и их расшифровка

Вирус Эпштейна-Барр (эпштейн барр, ВЭБ) при ухудшении иммунитета способен привести к развитию для организма различных патологий – от кожных проявлений и синдрома хронической усталости до злокачественных новообразований.

Одна из самых распространенных проблем, вызванных ВЭБ – это патология инфекционный мононуклеоз. Варианты того, как проявит себя инфекция, разнообразны и индивидуальны.

Ввиду этого при подозрении на заражение таким возбудителем, как вирус эпштейна барр диагностика должна проводиться комплексно, на основе проведенных в лаборатории анализов.

Какие диагностические процедуры применяют

Диагностировать развитие какой-либо формы заболевания, врач может на основании жалоб пациента, по результатам его клинической картины и, кроме того, результатов лабораторных анализов.

Чтобы выявить инфекцию, проводят такую диагностику:

• серологические реакции;
• ПЦР;
• анализы крови общий и биохимический (печеночные пробы).

Исследование крови поможет узнать об изменениях показателей и наличии атипичных мононуклеаров. Биохимический анализ помогает определить в крови повышение ферментов АСТ и АЛТ, ЛДГ и других. Проведение серологических реакций с помощью метода иммуноферментного анализа определяет содержание и тип иммуноглобулинов IgM и IgG – антител к ВЭБ.

При проведении анализов на вирус эпштейна необходимо учитывать, что он обитает в организме почти каждого взрослого человека и, у значительного количества детей. Поэтому положительный результат после проведенной диагностики может означать всего лишь наличие вируса, но не развитие патологии.

Общий анализ крови

В случае, когда ВЭБ активен, исследования крови обязательно будут меняться. Происходит это в связи с особенностью патогенеза герпетической инфекции. Какие изменения в крови характерны для этого состояния?

Для эритроцитов норма 4-5.1 млн. на мкл у мужчин и 3.7- 4.7 млн. на мкл у женщин. Они остаются в этих пределах или немного меньше. Показатели гемоглобина также остаются в пределах нормы или слегка понижаются. Но в особо сложных случаях его уровень может спуститься ниже 90 г/л., вплоть до анемии.

А вот уровень лейкоцитов при таком вирусе обычно высокий, то есть больше, чем 9 Г/л. Типичным считается повышение лейкоцитов в разгар обострения инфекции. Увеличение показателя количества этих элементов называется лейкоцитоз.

Его наличие считается одним из основных признаков развития в организме инфекции.

Норма содержания базофилов – 0-1%. Выраженная реакция лимфоузлов иногда приводит к тому, что выявляется повышенный уровень содержания таких клеток в крови. Показатель эозинофилов при ВЭБ обычно не повышается.

Незначительное увеличение количества этих элементов может находиться в крови уже на этапе выздоровления. Вследствие повышения уровня лимфоцитов может немного понизиться уровень сегментоядерных нейтрофилов.

Их повышение обычно означает присоединение на фоне вирусной болезни бактериальной инфекции. Примером такого положения служит появление, например, ангины с осложнениями.

Распознать развитие мононуклеоза можно, в частности, по изменениям элементов моноцитов. При болезни их уровень всегда повышен, а дополнительные исследовании часто замечают наличие моноцитов изменившейся формы и размеров. Их назвали атипичными мононуклеарами.

В большинстве случаев при ВЭБ в крови находится приблизительно 20-40% этих частичек. Но иногда содержание атипичных мононуклеаров составляет меньше 10%.

При этом другие признаки развития патологического процесса могут быть найдены, а значит, вероятность инфекции не исключается.

Пока длится период активного инфекционного процесса, характерно ускорение процесса оседания эритроцитов.

Печеночные пробы

При активизации ВЭБ часто увеличивается селезенка, а вместе с ней и печень. В связи с этим появляется необходимость в контроле биохимических показателей крови. Довольно часто болезни типа мононуклеоза, сопровождает появление желтухи.

Как выглядят результаты печеночных проб, если ВЭБ в организме активизировался?

Обычно при его развитии наблюдается повышение таких показателей (в скобках указана норма для здорового организма):

• трансаминазы значительно;
• билирубин общий (до 20 ммоль/л);
• тимоловая проба (до 5 ЕД);
• активность АлАТ и АсАТ;
• степень содержания щелочной фосфатазы (30-90 ЕД/л).

Быстрый рост этих показателей и развитие желтухи часто означает появление такого проявления болезни, как гепатит, при котором больной нуждается в интенсивной терапии.

Трансаминазы – внутриклеточные ферменты, которые содержатся в организме в незначительном количестве – аланинаминотрансфераза (АЛТ) и аспартатаминотрансфераза (АСТ) Высвобождение большого количества АЛТ и АСТ в кровь наблюдается, если произошли какие-то повреждения в печени. Так, повышенное содержание АЛТ и АСТ в кровотоке можно обнаружить еще до проявления желтухи.

Серологическая диагностика вируса Эпштейн-Барр

При мононуклеозе, если провести анализ в инкубационном периоде или в начале болезни, по крови возможно выявить IgM-антитела. По прошествии нескольких месяцев от исчезновения симптомов заболевания, IgM прекращают определяться.

Антитела класса IgG остаются внутри организма человека, который переболел инфекцией данного типа, навсегда.

Рассмотрим, какова норма содержания в организме этих антител, а какие результаты анализа свидетельствуют о развитии патологии.

Возможные причины выявленных результатов

1.      Наличие отрицательного результата сообщает о том, что иммунная система с данным вирусом еще не знакома. Наличие клинических признаков инфекции в этом случае может оказаться симптомом иммунодефицита, например при заражении ВИЧ. Чтобы разобраться, дополнительно назначается анализ крови на определение ДНК ВЭБ (ПЦР).
2.      Подобные результаты чаще устанавливают в течение инкубационного периода и в первые семь дней проявления признаков болезни. При таком положении необходимо срочно начинать лечение.
3.      Выявление этих показателей свидетельствует о перенесенной некоторое время назад инфекции. Появляются они не раньше, чем спустя полгода после инфицирования ВЭБ. При таких результатах в особом лечении пациент не нуждается.
4.      Показатели характерны для первых недель инфицирования вирусом, то есть, острого периода. Больному необходима консультация врача и лечении, которое заключается в приёме противовирусных препаратов и терапии антибиотиками.
5.      Этот результат обозначает наличие обострения хронического заболевания или латентной формы. Лечение необходимо.
6.      Положительный тест по всем параметрам, указывает на обострение хронической патологии. Это значит, что возникли осложнения от инфекции, спровоцированные пониженным иммунитетом. Пациенту необходимо дополнительное обследование и назначение лечения.

В редких случаях, если при выявлении антител IgG к капсидному АГ их всё-таки обнаружили, это может говорить о сформированном у человека иммунитете к исследуемому вирусу. Если один из результатов оказался сомнительным, через пару недель необходимо повторить исследование.

ПЦР-диагностика

При исследованиях на вирус эпштейна барр диагностика ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это способ отыскать ДНК вируса. Принципиально важно применение этой методики у детей.

В юном возрасте серологические исследования не могут предоставить полную клиническую картину, потому что иммунная система в этот период еще не сформировалась окончательно.

При помощи ПЦР можно изучить ДНК ВЭБ и сравнить его с ДНК известных вирусов, чтобы точно определить тип инфекции.

Для обнаружения днк вируса эпштейна барра необходим образец биоматериала пациента, содержащий частицы вируса.

Для проведения исследования требуется цельная кровь. Её забор проводится в пробирку с 6% раствором ЭДТА в расчете 50 мкл ЭДТА на 1 мл крови. Могут быть исследованы и другие биологические жидкости: слюна, моча, спинномозговая жидкость.

Анализ полимеразной цепной реакции проводят утром натощак, также в течение нескольких недель до забора нельзя принимать медикаменты.

Если болезнь находится на начальной стадии, и вирус ещё не начал множиться, при диагностике обычно определяется норма, но этот результат является ложным.

Заключение

Вирус Эпштейна-Барр содержится в организме почти каждого человека. Именно поэтому при диагностировании его наличия необходимо уделить внимание сопутствующим симптомам, таким, как повреждение печени, о котором свидетельствуют результаты печеночных проб – увеличение показателей ферментов АЛТ и АСТ, билирубина и т.д.

Но основными тестами, которые могут выявить в организме ВЭБ, считают анализ крови, серологические исследования, и метод, определяющий наличие ДНК вируса – ПЦР. Именно результаты этих реакций помогут определить состояние вируса в организме конкретного человека и определить необходимость лечения.